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Accutase—做凋亡必备的细胞消化神器

Category:行业资讯
Time: 2014-9-18 19:10:15
By: admin

 

 

Accutase细胞分离溶液

在体外培养黏附干细胞时，常常需要消化分离细胞，这种分离分散细胞的操 作在细胞传代时常是必须的例行操作，但有时候如干细胞需要转染、计数以及分析检测（如流式细胞术）等情况也需要分离细胞操作的。对大多数应用，常用蛋白酶 消化分离细胞，然而，这些酶（如胰酶）对干细胞是有害的，能作用细胞膜上的蛋白与基质，而且还需要淬灭失活。因此，这些酶作用干细胞时一定要严格控制以防 止干细胞失去发育潜力与死亡。

AccutaseTM细胞分离溶液是一种胶原酶制备物，可安全有效的消化分离细胞，无需任何添加血清失活操作。研究证明，利用Accutase细胞分离溶液分离细胞传代培养数代，对细胞生长形态、多潜能的标记抗原分子都维持的很正常。
 
Accutase细胞分离溶液具有以下无可比拟的优势：
● 温和快速高效地消化细胞(几分钟内完成粘附细胞的分离)，而不会破坏抗原表位影响流式分析(图3)；
● 温和有效的消化胚胎干细胞（hESCs和mESCs），冻存后细胞具有更高复苏率（图2）；
● 保持细胞最大活力，即使长时间消化（45min），细胞活力达97%±3%（图1）；
● 无需洗涤或中和，加入培养基即可使Accutase酶失活，节省时间；
● 同时具备蛋白酶和溶胶原活性，适合大部分细胞，应用更广泛；
● 可用于组织解离，进行原代细胞培养；
● 不含哺乳动物、细菌来源产品或昆虫杆状病毒表达组分；
 

图1 Accutase的细胞分离效果

组织培养处理的培养皿内经 （DMEM + 10% FBS）培养的人MG63纤维肉瘤细胞，用accutase消化得到的结果是：细胞快速分离，单一细胞悬液和高细胞活力。ACCUTASE温和作用于细胞，甚至消化45 mins后细胞活力仍达97 ± 3%。

图2 Accutase消化的hESCs冻存后具更高复苏率

培养在invitrogen SFM培养基中的hESC细胞经accutase或collagenase消化收集，收集的细胞相同条件下冻存。在LN2中保存2个月后，分别解冻和铺板培养。1天后用Countess自动细胞计数仪记录复苏细胞数、总细胞数及活细胞数，结果分组制图。

 

←图3

 

已在以下细胞中得到验证：

成纤维细胞、角蛋白细胞、血管内皮细胞、肝细胞、血管平滑肌细胞、肝细胞前体细胞、原代鸡胚神经元细胞、骨髓干细胞、CHO和BHK贴壁细胞、巨噬细胞、293细胞、L929细胞、永生小鼠生殖细胞、3T3、Vero、COS、HeLa、NT2、MG63、M24和A375转移性黑素瘤、神经胶质瘤U251和D54、HT1080纤维肉瘤细胞和Sf9昆虫细胞等。

 

Accutase细胞分离溶液订购信息，具体折扣请咨询。

 

产品名称 品牌 货号 规格 目录价
Accutase - Enzyme Cell Detachment Medium eBioscience 00-1555-56 100ml 348
Accutase cell detachment solution Millipore SCR005 100ml 363
Accutase cell detachment solution Mpbio 1000449 100ml 486
StemPro® Accutase® Cell Dissociation Reagent Gibco A11105-01 100ml 506
CellMates Accutase Cell Detachment Solution Miltenyi 130-095-545 100ml 770